Polissacarídeos de Lentinula edodes suprimem a expressão de citocinas pró-inflamatórias e de colite em camundongos / Lentinula edodes polysaccharides suppressed pro-inflammatory cytokines expression and colitis in mice

ABSTRACT Background: Polysaccharides from edible mushrooms possess immunomodulatory, anti-inflammatory, and anti-tumor activities. Recent studies indicated that necroptosis plays a role in the pathogenesis of inflammatory diseases and mediates increased expression of inflammatory cytokines. Objective: Therefore, it is imperative to determine the impact of polysaccharide extract from Lentinula edodes (L. edodes) on inflammatory cytokines in experimental model of colitis in mice. Methods: Female C57BL/6 mice divided into three or four mice per group were used for this study. Polysaccharide sample was orally administered to mice prior to (7 days) and during colitis induction with 2.5% dextran sodium sulfate (7 days), followed by additional 3 days of administration. Changes in body weight and colon length were used as markers for colitis, and pro-inflammatory cytokines and tumor necrosis factor receptor 1 (TNFR1) expressions, as well as necroptosis were analyzed in the colon of colitis mice. Data obtained were analysed by Tukey-Kramer and two-tailed standard t tests. Results: The results indicated that the polysaccharide sample suppressed colitis in mice using effects on the body weight and colon length as markers. Also, it was demonstrated that necrostatin-1, a specific inhibitor of necroptosis, suppressed the expression of interleukin (IL)-8, a pro-inflammatory chemokine, in Caco-2 cells induced necroptosis induced by zVAD and TNF-α, an indication that necroptosis may be involved in the expression of pro-inflammatory cytokines. Moreover, the polysaccharide sample suppressed the expression of pro-inflammatory cytokines such as tumor necrosis factor (TNF)-α, IL-6, IL-1β, and interferon (IFN)-γ in the colon of mice. Conclusion: These results suggested that the suppressive effects of the polysaccharide sample on inflammatory cytokines expression may contribute to its anti-colitis effect, and so may serve as a potent therapeutic agent against inflammatory bowel disease.

RESUMO Contexto: Polissacarídeos de cogumelos comestíveis possuem atividades imunomodulatórias, anti-inflamatórias e anti-tumorais. Estudos recentes indicaram que a necroptose desempenha um papel na patogênese de doenças inflamatórias e regula o aumento da expressão de citocinas inflamatórias. Objetivo: Torna-se imprescindível determinar o impacto do extrato de polissacarídeo de Lentinula edodes (L. edodes) em citocinas inflamatórias em modelo experimental de colite em camundongos. Métodos: Foram utilizados para este estudo os camundongos C57BL/6 femininos divididos em três ou quatro camundongos por grupo. A amostra de polissacarídeo foi administrada oralmente em camundongos antes (7 dias) e durante a indução de colite com sulfato de dextran sulfato de sódio (7 dias), seguido por 3 dias adicionais de administração. Alterações no peso corporal e comprimento do cólon foram utilizadas como marcadores para colite, e citocinas pró-inflamatórias e tumores receptor fator 1 (TNFR1), bem como necroptose foram analisadas no cólon de camundongos colite. Os dados obtidos foram analisados por testes Tukey-Kramer e testes padrão t de duas caudas. Resultados: Os resultados indicaram que a amostra de polissacarídeo suprimiu colite em camundongos usando efeitos sobre o peso corporal e o comprimento do cólon como marcadores. Além disso, foi demonstrado que a necrostatina-1, inibidora específica da necroptose, suprimiu a expres são de interleucina (IL)-8, uma quimiocina pró-inflamatória, em células caco-2 induzidas necroptose induzidas por zVAD e TNF-α, uma indicação de que a necroptose pode estar envolvida na expressão de citocinas pro-inflamatórias. Além disso, a amostra de polissacarídeo suprimiu a expressão de citocinas pró-inflamatórias, como o fator de necrose tumoral (TNF)-α, IL-6, IL-1β e interferon (IFN)-γ no cólon dos camundongos. Conclusão: Esses resultados sugeriram que os efeitos supressivos da amostra de polissacarídeo na expressão de citocinas inflamatórias podem contribuir para o seu efeito anti-colite, podendo, portanto, servir como um potente agente terapêutico contra doença inflamatória intestinal.

Effects of supplemental xylanase on in vitro disappearance of dry matter in feed ingredients for swine / Efectos de la suplementación con xilanasa sobre la desaparición in vitro de materia seca en ingredientes de piensos para cerdos / Efeitos da xilanase suplementar no desaparecimento in vitro de matéria seca em ingredientes de rações para suínos

Abstract Background: Alternative feed ingredients are widely used in swine diets to lower feed costs, but these ingredients contain a large quantity of non-starch polysaccharides. Supplemental xylanase is known to break down non-starch polysaccharides. However, the effects of exogenous xylanase from Bacillus subtilis on various feed ingredients have rarely been compared. Objective: To evaluate the effects of supplemental xylanase on in vitro disappearance of dry matter (DM) in various feed ingredients for pigs. Methods: Nine feed ingredients were used to measure in vitro ileal disappearance and in vitro total tract disappearance of DM. Each ground ingredient was supplemented with either supplemental xylanase (9,000 U/g) or cornstarch at 1.0%. Results: Supplemental xylanase increased in vitro ileal disappearance of DM in wheat, barley, wheat flour, and wheat bran (p<0.05). The in vitro total tract disappearance of DM for barley and wheat bran increased with xylanase addition (p<0.05). Conclusion: Exogenous xylanase could increase in vitro ileal DM disappearance in barley, wheat, wheat flour, and wheat bran, but did not affect in vitro total tract DM disappearance in wheat and wheat flour.

Resumen Antecedentes: Los ingredientes alternativos se utilizan ampliamente en las dietas porcinas para reducir los costos del pienso, pero estos ingredientes contienen una gran cantidad de polisacáridos no-amiláceos. Se sabe que la xilanasa suplementaria descompone los polisacáridos diferentes al almidón. Sin embargo, rara vez se han comparado los efectos de la xilanasa exógena de Bacillus subtilis en algunos ingredientes del alimento. Objetivo: Evaluar los efectos de la xilanasa suplementaria sobre la desaparición in vitro de la materia seca (MS) en varios ingredientes alimentarios para cerdos. Métodos: Se utilizaron nueve ingredientes del alimento para medir la desaparición ileal in vitro y la desaparición del tracto total in vitro de MS. Cada ingrediente molido se complementó con xilanasa suplementaria (9,000 U/g) o almidón de maíz al 1,0%. Resultados: La xilanasa suplementaria aumentó la desaparición ileal in vitro de MS en trigo, cebada, harina de trigo y salvado de trigo (p<0,05). La desaparición de tracto total de MS in vitro para la cebada y el salvado de trigo aumentó con la adición de xilanasa (p<0,05). Conclusión: La xilanasa exógena podría aumentar la desaparición de la MS ileal in vitro en cebada, trigo, harina de trigo y salvado de trigo, pero no afecta la desaparición de la MS en tracto total in vitro del trigo y la harina de trigo.

Resumo Antecedentes: Ingredientes alternativos para rações são amplamente usados em dietas para suínos para reduzir os custos da alimentação, mas esses ingredientes contêm uma grande quantidade de polissacarídeos não amiláceos. A xilanase suplementar é conhecida por quebrar polissacarídeos não amiláceos. No entanto, os efeitos da xilanase exógena de Bacillus subtilis em vários ingredientes da ração raramente foram comparados. Objetivo: Avaliar os efeitos da xilanase suplementar no desaparecimento in vitro da matéria seca (MS) em vários ingredientesde rações para suínos. Métodos: Nove ingredientes da ração foram usados para medir o desaparecimento ileal in vitro e o desaparecimento de MS in vitro do trato total. Cada ingrediente moído foi suplementado com xilanase suplementar (9.000 U/g) ou amido de milhoa 1,0%. Resultados: A xilanase suplementar aumentou o desaparecimento ileal in vitro de MS em trigo, cevada, farinha de trigo e farelo de trigo (p<0,05). O desaparecimento in vitro de MS do trato total para cevada e farelo de trigo aumentou com a adição de xilanase (p<0,05). Conclusão: A xilanase exógena pode aumentar o desaparecimento in vitro da MS ileal em cevada, trigo, farinha de trigo e farelo de trigo, mas não afetou o desaparecimento in vitro do trato total da MS no trigo e na farinha de trigo.

Composição química e aceitabilidade de pão sem glúten desenvolvido com mucilagem de quiabo / Chemical composition and acceptance of gluten-free bread developed with okra mucilage

Com objetivo de produzir pão sem glúten com composição química aprimorada e boa qualidade sensorial, foram elaboradas três formulações com diferentes quantidades de mucilagem de quiabo: (F0) 0 mL; (F1) 100 mL; (F2) 150mL. Determinou-se: rendimento da mucilagem, composição centesimal, valor calórico e atributos sensoriais dos pães por meio de escala hedônica. A mucilagem aumentou o rendimento das F1 e F2. Não houve diferença no teor de proteínas e o teor de lipídios de 7,9 g 100 g-1 (F1) e 6,0 g 100 g-1 (F2) foram inferiores ao da F0. A umidade da F1 (32,15 g 100 g-1) foi menor que nas demais formulações, enquanto cinzas (0,70 g 100 g-1), carboidrato (56,75 g 100 g-1) e valor calórico (308,1 kcal 100 g-1) foram superiores. No teste sensorial, todos os atributos foram avaliados nas categorias "gostei ligeiramente" e "gostei extremamente" pela maioria dos julgadores. A F1 obteve avaliações superiores às da F2 para textura, cor e impressão global e não diferiu em nenhum dos atributos na F0. Conclui-se que a F1 pode ser uma opção viável na busca de pão sem glúten com composição química aprimorada, por conter menor teor de lipídio e umidade, maior teor de cinzas e boa aceitação sensorial. (AU)

With the goal of producing gluten-free bread with improved chemical composition and good sensorial quality, three formulations were prepared with different amounts of okra mucilage: (F0) 0 mL; (F1) 100 mL; (F2) 150 mL. From this was determined: mucilage yield, centesimal composition, caloric value and sensory attributes of bread by hedonic scale. Mucilage increased the yield of F1 and F2. There was no difference in protein content and the lipid content of 7.9 g 100 g-1 (F1) and 6.0 g 100 g-1 (F2) were lower than that of F0. The moisture content of F1 (32.15 g 100 g-1) was lower than the other formulations, while ash (0.70 g 100 g-1), carbohydrate (56.75 g 100 g-1) and caloric value (308,1 kcal 100 g-1) were higher. In the sensory test, attributes were rated in the categories "liked slightly" and "liked extremely" by most judges. F1 scored higher than F2 for texture, color and overall impression and did not differ in any of the attributes at F0. It can be concluded that F1 may be a viable option in the search for gluten-free bread with improved chemical composition, as it contains lower lipid and moisture content, higher ash content and good sensory acceptance. (AU)

Composição química e aceitabilidade de pão sem glúten desenvolvido com mucilagem de quiabo / Chemical composition and acceptance of gluten-free bread developed with okra mucilage

Com objetivo de produzir pão sem glúten com composição química aprimorada e boa qualidade sensorial, foram elaboradas três formulações com diferentes quantidades de mucilagem de quiabo: (F0) 0 mL; (F1) 100 mL; (F2) 150mL. Determinou-se: rendimento da mucilagem, composição centesimal, valor calórico e atributos sensoriais dos pães por meio de escala hedônica. A mucilagem aumentou o rendimento das F1 e F2. Não houve diferença no teor de proteínas e o teor de lipídios de 7,9 g 100 g-1 (F1) e 6,0 g 100 g-1 (F2) foram inferiores ao da F0. A umidade da F1 (32,15 g 100 g-1) foi menor que nas demais formulações, enquanto cinzas (0,70 g 100 g-1), carboidrato (56,75 g 100 g-1) e valor calórico (308,1 kcal 100 g-1) foram superiores. No teste sensorial, todos os atributos foram avaliados nas categorias “gostei ligeiramente” e “gostei extremamente” pela maioria dos julgadores. A F1 obteve avaliações superiores às da F2 para textura, cor e impressão global e não diferiu em nenhum dos atributos na F0. Conclui-se que a F1 pode ser uma opção viável na busca de pão sem glúten com composição química aprimorada, por conter menor teor de lipídio e umidade, maior teor de cinzas e boa aceitação sensorial.

With the goal of producing gluten-free bread with improved chemical composition and good sensorial quality, three formulations were prepared with different amounts of okra mucilage: (F0) 0 mL; (F1) 100 mL; (F2) 150 mL. From this was determined: mucilage yield, centesimal composition, caloric value and sensory attributes of bread by hedonic scale. Mucilage increased the yield of F1 and F2. There was no difference in protein content and the lipid content of 7.9 g 100 g-1 (F1) and 6.0 g 100 g-1 (F2) were lower than that of F0. The moisture content of F1 (32.15 g 100 g-1) was lower than the other formulations, while ash (0.70 g 100 g-1), carbohydrate (56.75 g 100 g-1) and caloric value (308,1 kcal 100 g-1) were higher. In the sensory test, attributes were rated in the categories “liked slightly” and “liked extremely” by most judges. F1 scored higher than F2 for texture, color and overall impression and did not differ in any of the attributes at F0. It can be concluded that F1 may be a viable option in the search for gluten-free bread with improved chemical composition, as it contains lower lipid and moisture content, higher ash content and good sensory acceptance.

Avaliação da atividade imunomoduladora das pectinas in natura e modificadas obtidas de goiabas / Evaluation of immunomodulatory activity of non-modified and modified pectins from guava fruit

As pectinas presentes nas frutas, assim como sua versão modificada, estão entre as biomoléculas mais promissoras no campo da imunomodulação. Este estudo teve como objetivo avaliar o potencial imunomodulador de pectinas obtidas de goiabas verdes e maduras, bem como suas versões modificadas. As goiabas cv. Tailandesas foram avaliadas ao longo do amadurecimento, sendo acompanhadas as alterações da cor da polpa e casca, firmeza, produção de etileno e respiração, perda de massa e o teor de açúcares solúveis. Após a caracterização dos frutos, foram extraídas as pectinas e estas foram caracterizadas quanto ao conteúdo monossacarídico, peso molecular, presença de oligossacarídeos e grau de esterificação. As pectinas in natura de goiaba madura e verde, bem como a versão modificada desta última apresentaram frações de alto e baixo peso molecular, alta proporção de ácido galacturônico e alto teor de esterificação. Por outro lado, as pectinas modificadas derivadas de goiaba madura apresentaram maior desesterificação, com perda de frações de menor peso molecular, menor proporção de ácido galacturônico e baixo teor de esterificação. As pectinas foram incubadas com células THP-1 e RAW 264.7, e apesar da alta viabilidade celular e ausência de efeito citotóxico, resultou em expressiva produção de espécies reativas de oxigênio. De modo geral, as pectinas in natura de goiaba verde e madura, e pectina modificada de goiaba verde promoveram estímulo da produção de citocinas diversas, em especial inflamatórias, como IL-1ß, IL-12, CCL5, CXCL10 e CXCL9, para células THP-1 e IL-10 (antiinflamatória), TNF-α e MCP-1, demonstrando seu potencial imunomodulador, já para células RAW 264.7 as pectinas estimularam a produção de IL-10, TNF-α e MCP-1, demonstrando seu potencial imunomodulador. A pectina modificada derivada da goiaba madura não promoveu a indução significativa de nenhuma citocina. Estes resultados sugerem que as pectinas obtidas a partir de goiabas têm potencial imunomodulador e devem ser estudadas em outros modelos celulares e / ou em concentrações mais altas e modelos in vivo, para que esses benefícios possam realmente ser comprovados

The pectin present in fruits and their modified version are the most promising biomolecules in the immunomodulatory field. This study aimed to evaluate the immunomodulatory potential of pectins obtained from unripe and ripe guavas (Psidium guajava L.) cv. Thailandesa as well as their modified versions. The guavas were characterized during ripening regarding cell wall solubilization, sugar content, firmness, mass loss and ethylene production rate and respiration during 10th following harvest. After fruit characterization, pectins were extracted and characterized for monosaccharide content, molecular weight, presence of oligosaccharides and degree of esterification. Pectins from unripe and ripe guava as well as the modified versions of pectins had high and low molecular weight fractions, a high proportion of galacturonic acid and high esterification content. On the other hand, modified pectins derived from ripe guava showed higher de-esterification, with loss of lower molecular weight fractions, a lower proportion of galacturonic acid and low esterification content. The pectins were incubated with THP-1 and RAW 264.7 cells, and despite the high cell viability and absence of cytotoxic effect, the treatment resulted in the expressive production of reactive oxygen species. In general, pectins from ripe and unripe guava and modified pectin from unripe guava stimulated the production of diverse cytokines, especially inflammatory cytokines, such as IL-1ß, IL 12, CCL5, CXCL10, and CXCL9, for THP-1, while IL-10 (anti-inflammatory), TNF-α and MCP-1 were stimulated in RAW 264.7 cells, demonstrating their immunomodulatory potential. Modified pectin derived from ripe guava did not promote any significant induction of the cytokines investigated. These results suggest that pectins obtained from guavas have immunomodulatory potential and deserve a more in-depth investigation using other cellular models and/or use of higher concentrations and in vivo models tests so their immunomodulatory benefits can be prove

ß -glucan from saccharomyces cereviseae in skim yogurt production / ß-Glucana de Saccharomyces cereviseae na produção de iogurte desnatado

The demand for functional foods has increased in recent years, following a market trend in which the consumer values foods associated with health improvements. Skim milk yogurts were produced with yeast ß-glucan (YBG, 0.5 and 1.0 %) isolated from Saccharomyces cerevisiae and compared with full fat (FFY) and skim milk (SMY) yogurt as controls. The samples were analyzed for physical, chemical, color,syneresis, culture starter count, textural, microstructure and sensory attributes. Yeast ß-glucan was not able to retain the serum of yogurts during cold storage. Skim yogurt firmness increased with the addition of 0.5% yeast ß-glucan, presenting a more compact microstructure. Yogurts containing yeast ß-glucan had low scores by the untrained panelists in the sensorial analysis (0.5% YBG overall acceptance 5.2, FFY 6.8, SY 6.3) and low purchase intention. Thus, although similar characteristics were observed, low scores in the sensorial analysis and purchase intention were a barrier to commercializing skim milk yogurt with yeast ß-glucan developed in the present study

A demanda por produtos funcionais tem aumentado recentemente, seguindo um padrão no qual os consumidores valorizam os alimentos que são associados a melhoria da saúde. Iogurte desnatado foi produzido com ß-glucana extraída de Saccharomyces cerevisiae e comparado com iogurte integral e iogurte desnatado. O iogurte desnatado contendo ß-glucana não reteve soro durante a estocagem refrigerada. A firmeza do produto aumentou com a adição de 0,5% de ß-glucana e sua microestrutura foi mais compacta. Iogurtes contendo ß-glucana apresentaram menor escore na análise sensorial. Assim, embora características semelhantes tenham sido observadas, os baixos escores da análise sensorial são uma barreira para a comercialização de iogurte desnatado contendo ß-glucana produzido no presente estudo

Terapia celular combinada com membranas de biopolímeros melhora a cicatrização de úlceras em paciente com dermatomiosite juvenil / Combining cell therapy with biopolymer films improves wound healing in a juvenile dermatomyositis patient

Introdução: Dermatomiosite juvenil (DMJ) é doença sistêmica que afeta a musculatura proximal e a pele de crianças. A doença ulcerada é um desafio terapêutico. Objetivo: Avaliar a melhora da doença ulcerada na DMJ, pelo uso de terapia celular. Métodos: Realização de cocultura de fibroblastos e queratinócitos autólogos e aplicação dessas células nas úlceras juntamente com cola de fibrina e colocação de membrana de quitosana-alginato ou quitosana-xantana sobre as lesões. Resultados: Menos de 12 horas após a terapia, o paciente referiu completa eliminação da dor e, dentro de dois dias, estava presente tecido de cicatrização. Algumas das úlceras estavam quase completamente cicatrizadas no final da primeira semana, e algumas das calcinoses desapareceram. Essa técnica não cura a doença, mas melhora a qualidade de vida, sendo possível criopreservar as células saudáveis do paciente para tratar novas lesões. Sendo as células de origem autóloga, elimina-se o risco de rejeição. Além disso, esse procedimento não necessita de debridamento das lesões nem hospitalização. Conclusões: A aplicação de culturas autólogas de fibroblastos e queratinócitos em úlceras já é considerada tratamento efetivo em pacientes com queimaduras e outras feridas cutâneas e, agora mostrou-se também eficaz no tratamento de feridas na DMJ.

Introduction: Juvenile dermatomyositis (JDM) is a systemic disease that affects children's proximal musculature and skin. The ulcerated stage of the disease is a therapeutic challenge. Objective: To evaluate the improvement of ulcerated stage of JDM caused by the use of cell therapy. Methods: Co-culture of autologous fibroblasts and keratinocytes, application of these cells in ulcers in conjunction with fibrin glue, and placement of chitosan-alginate or chitosan-xanthan membrane on the lesions. Results: Less than 12 hours after therapy, the patient reported complete cessation of pain and, within 2 days, healing tissue emerged. Some of the ulcers were almost completely healed by the end of the 1st week, and some of the calcinoses disappeared. This technique does not cure the disease, however it improves the patient's quality of life, and it is possible to cryopreserve healthy cells to treat new lesions. Given the fact that the cells are of autologous origin, the risk of rejection is eliminated. Furthermore, this procedure does not require debridement of the lesions or hospitalization. Conclusions: The application of autologous cultures of fibroblasts and keratinocytes in ulcers is already considered an effective treatment in patients with burns and other skin wounds, and has now also been proven effective in the treatment of wounds in JDM.

Efeito do processamento químico e térmico do farelo de trigo na solubilização de polissacarí­deos benéficos para a saúde humana / Effect of chemical and thermal processing of wheat bran on the solubilization of polysaccharides beneficial to human health

A ingestão regular de fibras alimentares pode auxiliar na redução do risco de certas doenças crônicas, como doenças cardiovasculares, síndromes metabólicas, diabetes tipo 2 e alguns tipos de câncer. Dentre as principais fontes de fibras alimentares, destaca-se o grão de trigo, que é rico em fibras solúveis e insolúveis. O grão de trigo pode ser identificado por três macrorregiões distintas, sendo elas o pericarpo, o gérmen e o endosperma. O principal alimento oriundo do trigo é a farinha produzida através da moagem seriada do endosperma dos grãos, sendo o principal subproduto a casca do grão conhecido como farelo de trigo, cujo pericarpo é o principal constituinte. As fibras alimentares estão concentradas no pericarpo, ou seja, no farelo do trigo, e estão associadas através de uma estrutura tridimensional não uniforme e compactada, o que prejudica a solubilidade de polissacarídeos complexos diminuindo suas biodisponibilidades caso ingeridos na alimentação humana. Apesar do farelo de trigo ser um resíduo com razoável valor biológico e com alto teor de fibras, o principal destino do farelo é a alimentação animal. Devido ao fato do farelo de trigo possuir baixo custo, elevado teor de fibras e grande volume disponível no mercado, o objetivo desse trabalho é estudar três métodos físico-químicos que modifiquem a estrutura do farelo de trigo e permitam que uma maior quantidade de polissacarídeos se tornem mais solúveis em água. Uma vez diluídas, essas frações de polissacarídeos consideradas como fibras alimentares solúveis (FAS) poderão ser extraídas, isoladas e aplicadas como ingredientes na produção de alimentos funcionais, como margarinas e sucos. Assim, o projeto permitirá que a indústria de alimentos desenvolva uma fonte de fibras solúveis a partir de uma matéria prima de baixo custo e alta produção. As modificações químicas foram feitas em meio alcalino (solução de NaOH nas concentrações 0,025, 0,05 e 0,1M), meio ácido (solução de H2SO4 nas concentrações 0,25, 0,5e 1,0M) e com agentes oxidantes (solução de hipoclorito de sódio a 10%).Com relação ao rendimento da extração das frações solúveis, as extrações em meio ácido foram as melhores. Todos os polissacarídeos não amido extraídos do farelo de trigo apresentaram baixo peso molecular e composição de açúcares diferentes. Os polissacarídeos oriundos das extrações em meio ácido demonstraram mais glicose e um menor percentual de arabinose e xilose ao serem comparadas com a água, enquanto os oriundos das extrações alcalinas apresentaram um teor menor de glicose e maior de arabinose e xilose (em comparação com as frações da água). A partir da análise de açúcares (foi avaliado maiores quantidades dos monossacarídeos arabinose, xilose e glicose) e do rendimento das extrações, foram escolhidas 5 amostras, sendo elas a fração solúvel extraída em água, H2SO4 0,25 e 0,5M e NaOH0,25 e 0,1M para as análises do teor de ß-glicanos, compostos fenólicos, propriedades funcionais (propriedades espumantes, absorção de água, solubilidade e umidade) e efeito prebiótico. Como resultado, todas os polissacarídeos não amido apresentaram elevada solubilidade e não possuíram propriedades espumantes e de absorção de água (WAC) relevantes. O teor de compostos fenólicos foi reduzido em todas as frações solúveis, quando comparado com o teor de compostos fenólicos do farelo de trigo e o pequeno percentual remanescente de compostos fenólicos possui baixo poder redutor. Foi encontrado ß-glicano em todas as frações dos polissacarídeos não amido extraídas, sendo 0,82% nas frações extraídas em água, 0,97 e 2,79% nas frações extraídas com H2SO4 e 5,42 e 4,62% nas frações extraídas com NaOH 0,025 e 0,1M. Embora tenha sido encontrado ß-glicano em todas as amostras extraídas, somente as extrações em água e com NaOH 0,1 M apresentaram possível efeito prebiótico in vitro

Regular intake of dietary fiber can help to reduce the risk of certain chronic diseases, such as cardiovascular disease, metabolic syndromes, type 2 diabetes and some types of cancer. Among the main sources of dietary fiber is the wheat grain, which is rich in soluble and insoluble fibers. The wheat grain can be identified by three distinct macroregions, they are the pericarp, the germ and the endosperm. The main food made by wheat is its flour produced by serial grinding of the grain endosperm, and the main by-product is the husk of the grain known as wheat bran, whose pericarp is the main constituent. Food fibers are concentrated in the pericarp and are associated through a non-uniform and compacted three-dimensional structure, which impairs the solubility of complex polysaccharides, decreasing their bioavailability when ingested in human food. Although wheat bran is a residue with reasonable biological value and high fiber content, the main destination of the bran is animal feed. Due to the fact that wheat bran has a low cost, high fiber content and a great volume available in the market, the objective of this work was to study three physic-chemical methods that modify the structure of wheat bran and allow a greater amount of polysaccharides to become more soluble in water. Once diluted, these fractions of polysaccharides considered as soluble dietary fiber (FAS) can be extracted, isolated and applied as ingredients in the production of functional foods such as margarines and juices. Thus, the project will enable the food industry to develop a source of soluble fiber from a low-cost, high-yield raw material. The chemical modifications were made in alkaline medium (NaOH solution at concentrations of 0.025, 0.05 and 0.1M), acid medium (H2SO4 solution at concentrations of 0.25, 0.5 and 1.0M) and with oxidizing agents (10% sodium hypochlorite solution). In relation to the extraction yield of the soluble fractions, acid extraction was the best. All non-starch polysaccharides extracted from wheat bran had low molecular weight and different sugar composition. The polysaccharides from acid extraction showed more glucose and a lower percentage of arabinose and xylose when compared to water, while those from the alkaline extractions had a lower glucose content and higher arabinose and xylose (compared to the fractions from water). From the analysis of sugars (higher amounts of monosaccharides arabinose, xylose and glucose) and extraction yields, 5 samples were chosen, being the soluble fraction extracted in water, 0.25 and 0.5M H2SO4 and NaOH 0.25 and 0.1M for analyzes of ß-glycan content, phenolic compounds, functional properties (foaming properties, water absorption, solubility and moisture) and prebiotic effect. As a result, all non-starch polysaccharides exhibited high solubility and did not possess relevant foaming and water absorption properties (WAC). The content of phenolic compounds was reduced in all soluble fractions when compared to the phenolic compounds content of wheat bran and the small remaining percentage of phenolic compounds had low reducing power. ß-glucan was found in all fractions of the extracted non-starch polysaccharides, 0.82% in fractions extracted in water, 0.97 and 2.79% in fractions extracted with H2SO4 and 5.42 and 4.62% in fractions extracted with 0.025 and 0.1M NaOH. Although ß-glycan was found in all the extracted samples, only extractions in water and with 0.1M NaOH showed possible prebiotic effect in vitro

Molecular Characterization of Group B Streptococcus Serotypes By Multiplex Polymerase Chain Reaction / Caracterização molecular dos sorotipos de estreptococos do grupo b por reação multiplex pcr

OBJECTIVE: Group B Streptococcus (GBS) serotypes (Ia, Ib and II to IX) are classified based on variations in their capsular polysaccharide; their prevalence differs between different geographic areas. We examined the prevalence of all GBS serotypes in rectal and vaginal swab samples obtained from 363 pregnant women followed at a Brazilian referral center (Hospital da Mulher Professor Doutor José Aristodemo Pinotti); bacterial susceptibility to antibiotics was further determined. METHOD: Prevalence of positive GBS was evaluated by latex agglutination and by multiplex PCR analysis; bacterial susceptibility to antibiotics, such as clindamycin, erythromycin, levofloxacin, linezolid, penicillin and tetracycline was determined by the disk diffusion method. RESULTS: (a) standard GBS culture and the multiplex PCR analysis tested positive for 83 swabs, collected from 72 women (prevalence of GBS colonization: 72/363; 20%); the most prevalent Serotype was Ia (n=43/83; 52%), followed by serotype V (n=14/83; 17%); according to anatomical origin, serotype Ia accounted for 27/59 (46%) and 16/24 (67%) of the vaginal and rectal samples, respectively; PCR also identified serotypes Ib, II, III and VI. Serotype VI is rarely described and had not been previously reported in Brazil or in Latin America. (b) The latex agglutination test only identified 44 positive samples, all of which were serotyped: 34 of these samples (77%) had serotypes matching those identified by multiplex PCR. (c) Only one sample (serotype Ia) showed resistance to erythromycin and clindamycin. CONCLUSION: Regional studies on GBS serotypes prevalence are essential to guide immunoprophylactic interventions (vaccines) and the implementation of adequate antibiotic prophylaxis or treatment. In this study, the incidence of the serotype VI, a new and rare serotype of GBS was described for the first time in a Brazilian population.

OBJETIVO: Os sorotipos (Ia, Ib e II ao IX) do estreptococo do grupo B (GBS) são classificados baseado nas variações em seus polissacarídeos capsulares; sua prevalência difere entre diferentes áreas geográficas. Nós examinamos a prevalência de todos os sorotipos do estreptococo do grupo B em amostras de swabs vaginal e retal obtidas de 363 mulheres seguidas em um centro de referência brasileiro, o Hospital da Mulher Professor Doutor José Aristodemo Pinotti; a susceptibilidade bacteriana a antibióticos foi também determinada. MÉTODO A prevalência de estreptococo do grupo B positivo foi avaliada por aglutinação em látex e através de análise por multiplex PCR; susceptibilidade bacteriana a antibióticos, tais como clindamicina, eritromicina, levofloxacin, linezolide, penicilina e tetraciclina foi determinada pelo método de disco difusão. RESULTADOS: (a) Tanto a cultura padrão para estreptococo do grupo B quanto a análise por multiplex PCR testaram positivos para 83 swabs. A prevalência para colonização por GBS foi 20%. O sorotipo Ia foi o mais prevalente (n= 43/83; 52%), seguido pelo sorotipo V (n= 14/83; 17%); De acordo com a origem anatômica, o sorotipo Ia positivou 27/59 (46%) e 16/24 (67%) das amostras vaginais e retais, respectivamente; o teste de PCR também identificou os sorotipos Ib, II, III, VI. O sorotipo VI é raramente descrito e não reportado no Brasil ou na América Latina até esta data. (b) O teste de aglutinação em látex somente identificou 44 amostras positivas, todas das quais foram sorotipadas: 34 destas amostras (77%) tiveram os sorotipos coincidindo com aqueles identificados pela multiplex PCR. (c) Somente uma amostra (sorotipo Ia) mostrou resistência a eritromicina e clindamicina. CONCLUSÃO: Estudos regionais sobre a prevalência dos sorotipos do estreptococo do grupo B são essenciais para guiar medidas imunoprofiláticas (vacinas) e a implementação de adequada antibiótico profilaxia. Neste estudo, a incidência do sorotipo VI foi descrita pela primeira vez na população Brasileira, um novo e raro sorotipo do estreptococo do grupo B.

Effects of fungal- and plant-derived non-starch polysaccharides in macrophages

The consumption of fungal- and plant-derived non-starch polysaccharides (NSP) have been associated with reduced risk of cardiovascular diseases and cancer. In addition to promote physiochemical effects on the gastrointestinal tract and serve as substrate for the intestinal microbiota to produce short-chain fatty acids, NSP can interact with immune system cells including macrophages, which are crucial for tissue repair, lipid metabolism and host defense against foreign substances and pathogens. However, the effects of NSP in macrophages depends on their structure. Recently, it was showed that the chayote (Sechium edule) and the fungus Pleurotus albidus are promising sources of NSP with potential immunomodulatory effects in macrophages. In this study, it was explored the effects of cooking on the composition of NSP from chayote and evaluated their biological effects in macrophages. Furthermore, it was optimized a method for the extraction of mushroom NSP and characterized the structure and biological effects of NSP from P. albidus in macrophages. Results showed that the NSP from chayote pulp regulate cytokine secretion and phagocytosis by macrophages, and minor changes in composition during cooking influences their effects in macrophages. Furthermore, NSP from chayote induces cholesterol efflux and inhibits the expression of genes required for NLRP3 inflammasome activation in macrophages previously exposed to cholesterol crystals. Then, it was showed that the optimized method for the extraction of NSP from mushroom reduces by up to half the extraction time commonly required. Furthermore, results showed that P. albidus is source of easily extractable glucans with biological effects in macrophages. Results also suggest that glucans from P. albidus inhibit lipid-induced inflammation and foam-cell formation at distinct levels, with significant effects on NLRP3 inflammasome activation. Taken together, the results suggest that the benefits of chayote NSP is beyond their physical properties on the gastrointestinal tract, and that the P. albidus NSP offers potential health benefits that might be of relevance as a functional food ingredient

O consumo de polissacarídeos não-amido (PNA) de fungos e plantas tem sido associado a redução do risco de doenças cardiovasculares. Além de promoverem efeitos físicos no trato gastrointestinal e serem utilizados como substratos pela microbiota intestinal, os PNA podem interagir com células do sistema imune, como macrófagos, cruciais no reparo tecidual, metabolismo lipídico, e na defesa do organismo contra patógenos. Entretanto, os efeitos em macrófagos dependem da estrutura do PNA. Recentemente, foi observado que o chuchu (Sechium edule) e o fungo Pleurotus albidus são fontes de PNA com potencial efeito sobre macrófagos. Assim, foram avaliados os efeitos dos PNA do chuchu fresco e cozido em macrófagos. Além disso, foi otimizado um método para extração de polissacarídeos de cogumelo, e avaliada a estrutura e os efeitos biológicos dos PNA do P. albidus em macrófagos. Foi observado que os PNA do chuchu regulam a secreção de citocinas e o processo de fagocitose por macrófagos, e alterações na composição de PNA durante o cozimento tem um impacto em seus efeitos biológicos. Além disso, os PNA do chuchu induzem o efluxo de colesterol e regulam a expressão de genes necessários para a ativação do inflamassoma NLRP3 em macrófagos previamente tratados com cristais de colesterol. Também foi demonstrado que o método otimizado de extração de PNA de cogumelos reduz em até pela metade o tempo de extração normalmente empregado. Além disso, foi verificado que o P. albidus é fonte para extração de glicanos com efeitos em macrófagos. Os resultados também sugerem que os glicanos obtidos do P. albidus inibem em diferentes níveis a inflamação induzida por lipídeos e a formação de células espumosas, com efeitos significativos sobre a ativação do inflamassoma NLRP3. Tais diferenças parecem estar associadas à estrutura dos glicanos. Por fim, os resultados sugerem que os benefícios dos PNA do chuchu estão além dos seus efeitos físicos sobre o trato gastrointestinal, e que os PNA do P. albidus promovem benefícios que podem ser relevantes para explorar sua utilização como um alimento ou fonte para extração de ingredientes funcionais

Effects of different extracts of the mushroom Agaricus blazei Murill on the hematologic profile of mice with Ehrlich tumor / Efeitos de diferentes extratos do cogumelo Agaricus blazei Murill sobre o perfil hematológico de camundongos com tumor de Ehrlich

The aim of this study was to investigate the effect of the mushroom Agaricus blazeii Murril (ABM) extracts on the hematological profile of Swiss mice bearing an Ehrlich solid tumor. Three fractions (total extract, polysaccharides, and supernatant) of ABM extracts obtained by four methods (ultrasonic or water bath, at pH 4 or pH 7) were administered to mice over 21 days. Polysaccharide solutions were analyzed by gas and liquid chromatography that showed both mannose and glucose concentrations. The method of extraction influenced the degree of glucose polymerization and the mannose/glucose relationship. The treatment with ABM supernatant at pH 7 and water bath was associated with reduced concentrations of leukocytes and lymphocytes and altered the percentage of CD4+ and CD8+ lymphocytes in Ehrlich tumor-bearing mice. The treatment with the ABM extract in water bath and ultrasound at pH 4 resulted in lower lymphocyte counts, regardless of tumor presence, and greater granulocyte values in mice with Ehrlich tumor than in controls. We concluded that different fractions and methods of extraction of A. blazei produced differing blood profiles in mice inoculated with the Ehrlich tumor.

O objetivo deste estudo foi investigar o efeito de diferentes extratos do cogumelo Agaricus blazeii Murril (ABM) sobre o perfil hematológico de camundongos Swiss portadores de tumor de Ehrlich sólido. Três frações (extrato total, polissacarídeos e sobrenadante) dos extratos de ABM foram obtidas por quatro métodos (sonificador, banho-maria, em pH 4 ou pH 7) e administradas para camundongos durante 21 dias. Soluções de polissacarídeos foram analisadas por cromatografia gasosa e líquida, que mostraram concentrações de glucose e manose. O método de extração influenciou o grau de polimerização da glicose e a relação manose/glucose. O tratamento com o sobrenadante de ABM (em pH 7 e banho-maria) estava associado com reduzidas concentrações de leucócitos e linfócitos, além de alterar a porcentagem de linfócitos CD4+ e CD8+ em camundongos portadores de tumor sólido de Ehrlich. O tratamento com extratos de ABM, obtidos tanto em banho-maria como no sonificador em pH 4, resultou nas mais baixas contagens de linfócitos, independentemente da presença do tumor, e nos maiores valores de granulócitos em camundongos com tumor de Ehrlich. Conclui-se que os diferentes métodos de extração com as respectivas frações de A. blazei são capazes de intereferir no perfil hematológico de camundongos com tumor sólido de Ehrlich.

Benefits of maltodextrin intake 2 hours before cholecystectomy by laparotomy in respiratory function and functional capacity: a prospective randomized clinical trial / Benefícios na função respiratória e capacidade funcional com ingesta de maltodextrina 2 horas antes de colecistectomia por laparotomia: ensaio clínico prospectivo e randomizado

ABSTRACT Objective: To evaluate the change in respiratory function and functional capacity according to the type of preoperative fasting. Methods: Randomized prospective clinical trial, with 92 female patients undergoing cholecystectomy by laparotomy with conventional or 2 hours shortened fasting. The variables measured were the peak expiratory flow, forced expiratory volume in the first second, forced vital capacity, dominant handgrip strength, and non-dominant handgrip strength. Evaluations were performed 2 hours before induction of anesthesia and 24 hours after the operation. Results: The two groups were similar in preoperative evaluations regarding demographic and clinical characteristics, as well as for all variables. However, postoperatively the group with shortened fasting had higher values than the group with conventional fasting for lung function tests peak expiratory flow (128.7±62.5 versus 115.7±59.9; p=0.040), forced expiratory volume in the first second (1.5±0.6 versus 1.2±0.5; p=0.040), forced vital capacity (2.3±1.1 versus 1.8±0.9; p=0.021), and for muscle function tests dominant handgrip strength (24.9±6.8 versus 18.4±7.7; p=0.001) and non-dominant handgrip strength (22.9±6.3 versus 17.0±7.8; p=0.0002). In the intragroup evaluation, there was a decrease in preoperative compared with postoperative values, except for dominant handgrip strength (25.2±6.7 versus 24.9±6.8; p=0.692), in the shortened fasting group. Conclusion: Abbreviation of preoperative fasting time with ingestion of maltodextrin solution is beneficial to pulmonary function and preserves dominant handgrip strength. .

RESUMO Objetivo: Avaliar a alteração da função respiratória e da capacidade funcional, conforme o tipo de jejum pré-operatório. Métodos: Ensaio clínico prospectivo randomizado, com 92 pacientes do sexo feminino, submetidas à colecistectomia por laparotomia, observando jejum convencional ou abreviado de 2 horas com maltodextrina. As variáveis foram: pico de fluxo expiratório, volume expiratório no primeiro segundo, capacidade vital forçada, força de preensão palmar dominante e força de preensão palmar não dominante. As avaliações foram realizadas 2 horas antes da indução anestésica e 24 horas após a operação. Resultados: Os dois grupos foram semelhantes quanto às características demográficas, clínicas e em todas as variáveis estudadas, quando avaliadas no pré-operatório. No entanto, no pós-operatório, o grupo abreviado apresentou valores maiores que o grupo convencional para pico de fluxo expiratório (128,7±62,5 versus 115,7±59,9; p=0,040), volume expiratório no primeiro segundo (1,5±0,6 versus 1,2±0,5; p=0,040), capacidade vital forçada (2,3±1,1 versus 1,8±0,9; p=0,021), força de preensão palmar dominante (24,9±6,8 versus 18,4±7,7; p=0,001) e força de preensão palmar não dominante (22,9±6,3 versus 17,0±7,8; p=0,0002). Na avaliação intragrupo, houve diminuição nas variáveis ao se compararem os valores do pré-operatório em relação ao pós-operatório, exceto para força de preensão palmar dominante (25,2±6,7 versus 24,9±6,8; p=0,692) no grupo de jejum abreviado. Conclusão: A abreviação do tempo de jejum pré-operatório com solução contendo maltodextrina beneficia a função pulmonar e preserva a força de preensão palmar dominante. .

Análise preliminar do tratamento de Diabetes mellitus com Polissacarídeo de Tremella fuciformis / Preliminary analysis of the treatment of Diabetes mellitus with Tremella fuciformis polysaccharide

Introdução: O Diabetes mellitus é uma desordem metabólica que ocorre no mundo inteiro, caracterizada por hiperglicemia associada a problemas com secreção ou ação da insulina ou, ainda por alterações no metabolismo intermediário de carboidratos, proteína e lipídeos. O cogumelo Tremella fuciformis (Basideomycota) foi isolado no Brasil e levado para a China onde tem sido produzido e utilizado como alimento por apresentar diversas atividades biológicas como anti-inflamatório, anti-mutagênico, reduz hipertensão, reduz diabetes entre outras propriedades relacionadas com imunidade. A Embrapa de Brasília tornou isolar o cogumelo e enviou a universidade para os testes preliminares. Objetivo: O presente trabalho teve como objetivo induzir a diabetes em ratos e realizar tratamento com polissacarídeo (PS) extraído do cogumelo gelatinoso Tremella fuciformis, desenvolvido em frascos no laboratório. Método: Ratos, no total de 28 animais foram divididos em 4 grupos sendo: 1-Normal) grupo recebendo dieta normal e água; 2-Sacarose) grupo recebendo ração normal e uma solução de sacarose 20% por 65 dias; 3-Sacarose + PS) grupo recebendo ração normal + solução de sacarose (65dias) e por gavagem PS na concentração de 1mmol (nos últimos 20 dias sendo uma vez/semana) ; 4-idem ao grupo 3, entretanto PS com concentração de 2mmol. No período, os ratos (uma vez/semana) foram pesados e submetidos a teste de glicose (fita Accu Check) e, depois sacrificados com dose letal de analgésico e coleta do sangue para testes de glicose, colesterol, triglicérides, creatinina e HDL. Resultados: Os resultados parciais demonstraram que os animais submetidos à dieta com sacarose aumentaram o peso e glicemia. Já os animais submetidos a tratamento com o PS permaneceram com o peso praticamente constante e, redução da glicemia. A creatinina tem sido um parâmetro para diagnosticar problemas renais, mas os animais em todos os tratamentos, não apresentaram diferença estatística. Para colesterol os animais submetidos ao tratamento com o PS apresentaram valores abaixo dos encontrados no grupo com sacarose, entretanto, com triglicérides e HDL apresentaram diminuição, mas houve, aumento em relação aos animais do grupo normal, indicando controle nos lipídeos. Por conclusão os resultados preliminares demonstraram que o PS extraído do cogumelo Tremella fuciformis apresenta grande potencial como produto natural contra diabetes.

ANTIOXIDANTES E BETA-GLUCANAS EM BARRAS DE CEREAIS COM Agaricus brasiliensis / ANTIOXIDANTS AND BETA-GLUCAN IN CEREAL BARS WITH Agaricus brasiliensis

O objetivo deste trabalho foi avaliar a capacidade antioxidante, a concentração de compostos fenólicos e de beta-glucanas em barras de cereais com Agaricus brasiliensis. As barras de cereais foram elaboradas por delineamento para mistura simplex-centroide para três variáveis: aveia, gergelim e trigo fermentado com A. brasiliensis. Os teores de ß-glucanas nas amostras variaram de 1,30 a 3,82 g.100 g-1 e os compostos fenólicos de 67,45 a 81,96 mg EAG.100 g-1, constatando-se capacidade antioxidante na faixa de 29,47 a 40,17 mg CAET.100 g-1. A adição de micélio de Agaricus brasiliensis em produtos alimentícios pode torná-los mais saudáveis, devido às propriedades nutritivas e compostos bioativos desse micro-organismo.

Immediate and long-term effects of polysaccharides-based formulations on human skin

A new trend in cosmetic formulations is the use of biotechnological raw materials as the polysaccharides from Klebsiella pneumoniae, which are supposed to enhance cell renewal, improve skin hydration and micro-relief. Botanical extracts of Myrtus communis leaves contain different sugars, which may provide the same benefits. Thus, the objective of this study was to evaluate through objective and subjective analysis the immediate and long-term effects of cosmetic formulations containing polysaccharides biotechnologically-originated and / or the ones contained in Myrtus communis extracts. Three polysaccharide-based and placebo formulations were applied on the forearm skin of 40 volunteers. Skin hydration, transepidermal water loss (TEWL), viscoelasticity and skin micro-relief measurements were made before and 2 hours after a single application and after 15 and 30 day-periods of daily applications. Answers to a questionnaire about perceptions of formulation cosmetic features constituted the subjective analysis. All polysaccharide-based formulations enhanced skin hydration. Formulations with isolated or combined active substances improved skin barrier function as compared to placebo, in the short and long term studies. Formulations containing Myrtus communis extracts had the highest acceptance. Results suggest that daily use of formulations containing these substances is important for protection of the skin barrier function.

Uma nova tendência em formulações cosméticas é a utilização de matérias-primas biotecnológicas como os polissacarídeos de Klebsiella pneumoniae, que pode aumentar a renovação celular e melhor a hidratação e micro-relevo da pele. Por outro lado, o extrato vegetal de Myrtus communis contém diferentes polissacarídeos, que também podem proporcionar benefícios à pele. Assim, o objetivo do estudo foi a avaliação dos efeitos imediatos e em longo prazo, de formulações cosméticas contendo polissacarídeos obtidos por processo biotecnológico e/ou de extrato de M. communis por meio de análises objetivas e subjetivas. Três formulações contendo os polissacarídeos e um placebo foram aplicadas na pele dos antebraços de 40 voluntários. As medidas foram realizadas antes e após 2 horas da aplicação das formulações e após 15 e 30 dias de aplicações diárias em termos de hidratação da pele, perda transepidérmica de água (TEWL), viscoelasticidade e micro-relevo da pele. Para a análise subjetiva, os voluntários responderam um questionário a fim de obter-se informações sobre a percepção relativa à qualidade de cosméticos. Todas as formulações provocaram aumento da hidratação cutânea. As formulações que continham os polissacarídeos melhoraram a função barreira da pele, em curto e em longo prazo. A formulação contendo extrato de M. communis apresentou maior aceitação. Os resultados sugerem que o uso diário dos polissacarídeos avaliados é importante na proteção da função barreira da pele.

Desenvolvimento e avaliação da resposta imune humoral de uma vacina anti-pneumocócica conjugada polissacarídeo capsular sorotipo 14 - proteína de superfície pneumocócica A / Development and evaluation of the humoral immune response of na antipneumococcal conjugate vaccine: capsular polysaccharide serotype 14-pneumococcal surface protein A

Streptococcus pneumoniae é uma bactéria encapsulada que coloniza a nasofaringe, sendo uma das principais causas de morte por pneumonia e meningite em crianças e idosos. As vacinas contra S. pneumoniae são compostas por polissacarídeos capsulares (PS) livres ou conjugados à uma proteína. A vantagem do polissacarídeo conjugado em relação ao livre é a resposta timo-dependente. Pelo fato de existirem pelo menos 92 diferentes sorotipos capsulares, a utilização de uma proteína pneumocócica em uma vacina conjugada com apenas alguns sorotipos poderia aumentar a sua cobertura vacinal. Para tal, a utilização da proteína de superfície pneumocócica A (PspA) foi utilizada como carreador protéico covalentemente ligado ao polissacarídeo capsular sorotipo 14. Este trabalho também apresenta uma nova metodologia para a síntese de vacinas conjugadas, que vem demonstrando melhores resultados em nosso laboratório em comparação aos métodos clássicos de conjugação. O conjugado PS14-PspA foi administrado em camundongos BALB/c e o título de IgG anti-PS14 e anti-PspA, o índice de avidez, a deposição de complemento e a distribuição das subclasses de IgG foram avaliados. O título de IgG anti-PS14 conjugado foi significativamente maior do que título de IgG anti-PS14 livre. A avidez e a deposição de complemento do soro anti-PS14 conjugado também foram maiores. A principal subclasse de IgG induzida pelo PS14 livre foi IgG3 enquanto o PS14 conjugado induziu preferencialmente IgG1. No entanto, o índice de avidez, o perfil de distribuição das subclasses de IgG e a medida funcional da atividade opsonofagocítica dos soros anti-PspA livre e conjugada foram os mesmos.

Streptococcus pneumoniae is an encapsulated bacterium that colonizes the nasopharynx, being one of the leading causes of death from pneumonia and meningitis in infants and elderly. Vaccines against S. pneumoniae are constituted by plain capsular polysaccharide (PS) or conjugated to a protein. The advantage of conjugated PS on plain PS vaccine is the thymus dependent immune response. Since there are at least 92 different capsular serotypes, the use of a pneumococcal protein in a conjugate vaccine using only few serotypes might broader its coverage. For this purpose the pneumococcal surface protein A (PspA) was used as protein carrier to bind covalently to the capsular polysaccharide serotype 14. This work also presents a new methodology for the synthesis of conjugate vaccines, which showed better results in our laboratory in comparison to the classic ones. The conjugate PS14-PspA was injected in BALB/c mice and sera were measured for IgG titer against PS14 and PspA. IgG avidity index, complement deposition, and anti-PS14 and anti-PspA IgG subclasses were also evaluated. IgG titer against conjugated PS14 was significantly higher than IgG titer against control PS14. The avidity and the complement deposition of conjugated anti-PS14 serum were also higher. The main IgG subclass induced by free PS14 was IgG3 while conjugated PS14 induced preferably IgG1. Nevertheless, the avidity index, the IgG subclasses distribution profile, and the functional opsonophagocytic measure from free and conjugated anti-PspA sera were the same.

Effect of different 1 percent chlorhexidine varnish regimens on biochemical composition of the dental biofilm / Efeito de diferentes posologias do verniz de clorexidina a 1 por cento na composição bioquímica do biofilme dentário

PURPOSE: This investigation evaluated in a randomized controlled study the effect of different 1 percent chlorhexidine varnish (1 percentCHX-V) regimens on biochemical composition of the dental biofilm. METHODS: Subjects with mutans streptococci > 10(5) CFU/mL saliva, were allocated into 4 groups: A - single 1 percent CHX-V application; B - 1 percent CHX-V was applied once daily on 3 consecutive days; C - 1 percent CHX-V was applied 3 times with an interval of 4 days between each application; and D - placebo varnish was applied once daily on 3 consecutive days. Dental biofilm samples were collected at baseline and 1, 4, and 8 weeks after the final varnish application and evaluated for inorganic phosphate and insoluble polysaccharide concentrations. RESULTS: No difference was observed between all groups during the different experimental periods in relation to biochemical composition. After 1 week, a significant increase was observed in inorganic phosphate concentration, returning to baseline values after 4 weeks. All groups showed a significant decrease in insoluble polysaccharide concentration for more than 8 weeks after treatment. CONCLUSION: Varnish application resulted in modification of the dental biofilm toward a less cariogenic one.

OBJETIVO: Este estudo avaliou o efeito de diferentes posologias do verniz de clorexidina a 1 por cento (V-CHX1 por cento) na composição bioquímica do biofilme dental. METODOLOGIA: Voluntários com níveis de Streptococcus mutans > 10(5) UFC/mL saliva, foram divididos em 4 grupos: A - uma única aplicação do V-CHX1 por cento; B - aplicações de 1x/dia do V-CHX1 por cento durante 3 dias consecutivos; C - 3 aplicações de 1x/dia do V-CHX1 por cento com intervalos de 4 dias entre elas; D - aplicações de 1x/dia do verniz placebo durante 3 dias consecutivos. Amostras de biofilme dental foram coletadas, no início e após 1, 4 e 8 semanas das aplicações dos vernizes, e analisadas quanto às concentrações de fosfato inorgânico (Pi) e polissacarídeos insolúveis (PI). RESULTADOS: Não foram observadas diferenças, em relação à composição bioquímica, entre os grupos durante os diferentes períodos experimentais. Foi observado, após 1 semana, um aumento significativo nas concentrações de Pi, retornando aos valores iniciais após 4 semanas. Todos os grupos apresentaram uma redução significativa na concentração de PI por mais de 8 semanas após os tratamentos. CONCLUSÃO: A aplicação do verniz resultou em uma modificação do biofilme dentário tornando-o menos cariogênico.

Isolamento, fracionamento e atividade anticoagulante de iota-carragenanas da Solieria filiformis / Isolation, fractionation and anticoagulant activity of iota-carrageenans from Solieria filiformis

Este estudo teve como objetivo isolar, fracionar e avaliar o potencial anticoagulante de iota-carragenanas (i-CARs) da rodofícea Solieria filiformis, quando obtidas por dois métodos de extração (M I e M II). As i-CARs foram isoladas com papaína bruta em tampão acetato de sódio 0,1M (pH 5,0), contendo cisteína 5mM e EDTA 5mM (M I) ou água (80°C) (M II) e, em seguida, determinada sua composição química de carboidratos totais, sulfato livre (SL) e proteínas contaminantes. As i-CARs foram submetidas à cromatografia de troca iônica (DEAE-celulose) usando um gradiente de cloreto de sódio, sendo avaliado o tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA) e tempo de protrombina das frações obtidas e comparadas à heparina (193UI mg-1). Uma fração anticoagulante também foi submetida ao procedimento de eletroforese em gel de agarose a 0,5 por cento. A diferença no rendimento de i-CARs entre os métodos foi 10,14 por cento. A composição química de SL (29,40 por cento) e o fracionamento, por DEAE-celulose, indicaram o M I mais eficiente na obtenção de i-CARs, comparado ao M II. O TTPA também foi somente alterado para as i-CARs do M I. Contudo, a atividade anticoagulante in vitro de uma fração rica (8,52UI mg-1) foi inferior à da heparina.

This study aimed to isolate, fractionate and evaluate the anticoagulant potential of iota-carrageenans (i-CARs) from Solieria filiformis when two extraction methods (M I and M II) were used. i-CARs were isolated with papain in 0.1M sodium acetate (pH 5.0) containing 5mM cystein and 5mM EDTA (M I) or water (80°C) (M II), and then their chemical composition of total carbohydrates, free sulfate (FS) and contaminant proteins were determined. i-CARs were submitted to anion-exchange chromatography (DEAE-cellulose) using a sodium chloride gradient,being evaluated the activated partial thromboplastin time (APTT) and prothrombin time of obtained fractions and compared to heparin (193IU mg-1). A rich fraction of anticoagulant was also submitted to 0.5 percent agarose gel electrophoresis procedure. The difference of yield between methods was 10.14 percent. The chemical composition of FS (29.40 percent) and the fractionation by DEAE-cellulose showed M I more effectiveness in the obtaining of i-CARs compared to M II. The APTT was also modified for i-CARs from M I. However, the in vitro anticoagulant activity of a rich fraction (8.52IU mg-1) was inferior to heparin.

Anatomical and histochemical aspects of zigotic embryo and leaves in Coqueiro Anão / Aspectos anatômicos e histoquímicos de embrião zigótico e folhas em Coqueiro Anão

The paper provides information about histochemical staining reactions in leaves and embryos of 'Coqueiro Anão' (Cocos nucifera). It was compared in vitro coconut and autotrophic palm leaves. Reactions for insoluble polysaccharides and acidic compounds, protein, extractable lipids, lignin and other classes of compounds were tested using histochemical tests. None sample gave positive reaction for lignin and phenolic compounds. All the samples gave positive reaction for protein, starch and insoluble polysaccharides while acidic compounds were positive only in in vitro leaves. Both in vitro and autotrophic leaves gave positive reaction for lipids showing presence of cuticle even in in vitro leaves. Only autotrophic palm leaves showed idioblasts containing calcium oxalate crystals.

Este trabalho fornece informações sobre resultados de testes histoquímicos em folhas e embriões zigóticos de 'coqueiro anão' (Cocos nucifera). Foram comparadas folhas de palmeiras de cultura in vitro e autotróficas. Reações para polissacarídeos insolúveis e compostos acídicos, proteínas, lipídios, lignina e outras classes de compostos foram testadas por meio de testes histoquímicos. Nenhuma amostra foi positiva para lignina e compostos fenólicos. Todas as amostras foram positivas para proteína, amido e polissacarídeos insolúveis, enquanto compostos acídicos foram observados apenas em folhas cultivadas in vitro. Amostras de folhas in vitro e autotróficas apresentaram reação positiva para lipídios, demonstrando a presença de cutícula mesmo em plântulas in vitro. Somente folhas de palmeiras autotróficas apresentaram ideoblastos contendo cristais de oxalato de cálcio.

Características bioquímicas e microbiológicas do biofilme dentário formado in situ sobre materiais que contêm flúor ou fosfato de cálcio amorfo / Biochemical and microbiological characteristics of in situ dental plaque formed on materials containing fluoride or amorphous calcium phosphate

Muito tem se avaliado a respeito das propriedades físicas e químicas dos selantes de fóssulas e fissuras, mas pouco sobre seus efeitos no biofilme dentário. O objetivo deste estudo foi analisar as características bioquímicas e microbiológicas do biofilme dentário formado in situ sobre materiais que liberam flúor ou cálcio e fosfato. Dez voluntários utilizaram dispositivo intrabucal palatino contendo corpos-de-prova de materiais (Fuji IX GP, Auralay XF e Aegis) ou blocos de esmalte bovino. A fase experimental consistiu de 4 etapas de 8 dias cada e a utilização de sacarose para formação do biofilme. No 7º dia dos períodos experimentais foi determinado o pH do biofilme e no 8º dia, o biofilme dentário formado foi coletado para determinação de flúor (F), cálcio (Ca), fósforo (P) e polissacarídeos extracelulares insolúveis (PEI) além da microbiota. Verificou-se a liberação de F, Ca e P de cada material e dos blocos de esmalte após ciclagem de pH. Após a verificação da homogeneidade dos dados, testes paramétricos e não-paramétricos foram realizados para análise dos resultados (p<0,05). O biofilme dentário formado sobre os materiais que liberam flúor apresentou maior presença de F, Ca e P e menor número de estreptococos do grupo mutans quando comparado ao bloco de esmalte. Após o uso da sacarose (7º dia), o pH do biofilme foi maior na presença do material ionomérico. O biofilme sobre o material que contém fosfato de cálcio amorfo mostrou similar concentração de Ca e P, quando comparado aos materiais que contém flúor, e uma ação tamponante no meio, sem efeito na microbiota. Concluiu-se que os materiais que liberam flúor aumentaram as concentrações de F, Ca e P e diminuíram a de PEI e a microbiota cariogênica do biofilme dentário; e o que contém fosfato de cálcio amorfo aumentou as concentrações de Ca e P.

The chemical and physical properties of the pit and fissures sealants have been widely evaluated but rare researches focus on the effects on dental plaque. The aim of this study was to evaluate the biochemical and microbiological characteristics of the in situ dental plaque formed on materials that release fluoride or calcium and phosphate. Ten volunteers wore an intraoral palatal device containing specimens of materials (Fuji IX GP, Auralay XF and Aegis) or bovine enamel blocks. The experimental phase consisted of 4 stages with duration of 8 days each and use of sucrose to form the dental plaque. The dental plaque pH was determined at the 7th day of the experimental periods and the dental plaque was collected at the 8th day to determine the fluoride (F), calcium (Ca), phosphorus (P), insoluble extracellular polysaccharides (EPS) and microbiota. It was observed release of F, Ca and P from each material and from the enamel blocks after pH cycling. After verification of data homogeneity, parametric and non-parametric tests were performed (p<0.05). The dental plaque formed on the materials that release fluoride presented more F, Ca and P and reduced number of Streptococcus mutans in comparison to the enamel block. After use of sucrose (7th day), the dental plaque pH was higher with the presence of ionomeric material. The dental plaque on the material containing amorphous calcium phosphate exhibited similar Ca and P concentration compared to the ones on fluoride materials, and buffering action with no effect on the microbiota. It was concluded that the materials that release fluoride increased F, Ca and P concentrations, decreased EPS concentration and the cariogenic microbiota of the dental plaque; the amorphous calcium phosphate material increased concentrations of Ca and P.